رنگ آمیزی غیر حیاتی

[masi eng 47044]

اساس و پایه رنگ آمیزی ترکیب مولکول های ماده رنگی مورد نظر با مولکول های اندامک های سلولی یا اجزای هدف می باشد. تعدادی از مواد رنگی به صورت رنگ عمومی کاربرد دارند و برخی از رنگ ها مثل سبزمتیل اسیدی رنگ اختصاصی هسته است.

تعدادی از رنگ های مورد استفاده رنگ های اسیدی و تعدادی دیگر جزو رنگ های بازی هستند که این مواد هم با قسمت های آنیونی و هم کاتیونی غشای اندامک ها ترکیب و موجب رنگی شدن آن ها می شوند.

کار رنگ آمیزی بر حسب کار با سلول زنده و سلول مرده تفاوت هایی دارد.

الف- رنگ آمیزی ساده:

در مواردی که هدف مطالعه، شناسایی یک نوع بافت خاص باشد و از یک ماده رنگی معرف استفاده می شود رنگ آمیزی را ساده گویند.

ب- رنگ آمیزی مرکب:

در مواردی که هدف از مطالعه شناسایی بافتهای مختلفی مثلا چوبی و سلولزی می باشد، باید بیش از یک معرف رنگی استفاده نمود که چنین رنگ آمیزی را رنگ آمیزی مرکب ( مضاعف) گویند.

رنگ آميزي غير زيستي هسته چون هسته در حالت زنده به علت شفاف بودن قابل رويت نيست بنابراين براي تشخيص آن بايد از رنگ هاي اختصاصي هسته استفاده کرد: رنگ آميزي هسته با سبز متيل : اسیدی

قطره اي از آب حاوي تک ياخته را روي لام قرار دهيد و سپس يک قطره از رنگ سبز متيل 1% به ان بيافزاييد و با لامل بپوشانيد

پس از 5 دقيقه لام را زير ميکروسکوپ ببينيد

-در صورت پر رنگ بودن سيتوپلاسم از اسيد استيک ميتوان استفاده کرد

در اين رنگ آميزي هسته سبز ميشود

رنگ آميزي هسته با استو اورسيين:

ابتدا یک قطره از نمونه کشت داده شده تک سلولی را بر روی لام قرار دهید.یک قطره رنگ استو اورسیین به آن اضافه کرده و لام را برای مدت کوتاهی به ملایمت حرارت میدهیم تا رنگ تشدید شود شود.آنگاه یک قطره دیگر رنگ روی آن بریزد و لامل را بر روی آن قرار داده و زیر میکروسکوپ مشاهده میکنیم.

در این روش رنگ آمیزی هسته به رنگ قرمز تیره و سیتوپلاسم به رنگ صورتی در می آید

 

رنگ آمیزی هسته با آبی متیلن

رنگ آمیزی غیر حیاتی تاژک ها و مژک ها با لوگول

برای تشخیص بهتر تاژک ها و مژک ها باید آنها را رنگ آمیزی کرد. این رنگ آمیزی ها غیر زیستی بوده و باعث کشته شدن سریع یاخته ها می شود. دو روش از این نوع رنگ آمیزی به قرار زیر است:

قطره ای ازآب محتوی نمونه مورد نظر را روی لام قرار دهید و یک قطره محلول لوگل غلیظ روی آن بریزید، سپس آن را با لامل بپوشانید و با عدسی 40× زیر میکروسکوپ ببینید.

منبع: کتاب آزمایشگاه زیست شناسی سلولی / انتشارات پیام نور