شمارش کل تعداد میکروب های خاک

[soil eng 17,164]

شمارش مستقیم میکروسکوپی:

 

 

در این روش یک سوسپانسیون (جامد در مایع) از اب با خاک درست میکنیم(1000 سی سی محلول

 

 

با 10 گرم خاک).

 

 

از نسبت تهیه شده حدود 50 میکرولیتر از محلول رویی برداشته و روی لام میگذاریم تا خشک و فیکس گرددو برای رنگ آمیزی اماده شود.

 

 

بعد از رنگ امیزی با استفاده از میکروسکوپ شمارش را انجام میدهیم.و بعد از محاسبات لازم و تناسب بندی تعداد کل میکروب ها را در کل خاک بدست میاوریم.

 

 

در این روش باکتری های زنده و مرده شمارش می شوند و این از معایب این روش می باشد

 

 

 

 

شمارش کلنی:

نسبت مشخصی از اب و خاک درست میکنیم و از این رقت درست شده

 

 

0.1 سی سی برداشته و روی محیط کشتی که داخل پتری دیش هست میریزیم و با استفاده از میله شیشه ای که از قبل استریل شده روی محیط کشت پخش میکنیم.(spread plate)

 

 

به مدت 1 هفته در دمای 26-28 درجه سانتی گراد نگه میداریم و بعد از گذشت این زمان کلنی هایتشکیل شده را شمارش میکنیم.

 

 

این روش مخصوص روش هوازی است .در روش بی هوازی اول رقت مورد نظر را پخش میکنند و بعد محیط کشت راروی آن میریزند

 

نعداد باکتری = تعداد کل شمارش شده *رقت * 10

10=چون از محلول مورد نظر 0.1 سی سی برداشتیم

 

 

 

 

 

MPN: Most Probable Nomber

 

 

 

اولین گام در این روش رقیق کردن خاک به روش ده دهی است(serial dilution)

 

 

یک ارلن حاوی 95 سی سی آب مقطر استریل که دهانش با پنبه سفت شده است اماده میکنیم

 

 

سپس 10 گرم خاک را وزن نموده و این مقدار خاک را در کنار شعله چراغ الکلی با برداشتن

 

 

پنبه از دهانه ارلن به داخل آن میریزیم و به ارامی و بمدت 10 دقیقه هم میزنیم

 

 

در مرحله بعد به 8 عدد لوله آزمایش که حاوی 9 سی سی آب مقطر است و 8 عدد پیپت 1 سی سینیاز داریم.

 

 

در ادامه به روش ده دهی از لوله آزمایش اولی برداشته و به لوله بعدی اضافه میکنیم.

 

 

این مرحله را 3 بار دیگر برای رقت های آخر ادامه میدهیم.

 

 

در این روش برای بدست اوردن تعداد نیاز به جدول محتمل ترین عدد داریم.