جستجو در تالارهای گفتگو

گویچه های سرخ خون به شکل سلول های گرد یا بیضی مقعرالطرفین هستند و قطر آنها حدود 5/6 تا 8 میکرون است. گویچه های سفید خون براساس دانه دار بودن یا نبودن سیتوپلاسم به دو دسته ی 1- گرانولار(دانه دار) و 2- آگرانولار (بدون دانه) تقسیم بندی میکنند. برای شناسایی لوکوسیتها از رنگ های خاصی به نام رنگهای نوع رومانوسکی استفاده میشود که مخلوطی از چند نوع رنگ با خاصیت اسیدی و بازی است . رنگ های موجود در این مخلوط رنگی عبارت اند از : ائوزین(معرف رنگی نارنجی تا قرمز،رنگ اسیدی با بار منفی)، آبی متیلن(معرف رنگی آبی ،رنگ بازی با بار مثبت) ، ورنگهای آزور که مانند آبی متیلن خاصیت بازی دارند. آگرانولار ها :شامل لنفوسیت ها و مونوسیت ها میشوند. لنفوسیت ها از مونوسیت ها کوچکترند و اغلب هسته ی بزرک و مشخصی دارند که یا به صورت بزرگ ومتراکم و یا پهن و فرو رفته مشاهده میشوند.در حالی که مونوسیت ها هسته نعل اسبی و یا لوبیایی شکل دارند که از تراکم کروماتینی کمی برخوردار است . و به صورت شبکه نازک تور مانند دیده میشود. سیتوپلاسم آنان به رنگ آبی یا خاکستری در میاید. گرانولارها : نوتروفیل ها معمولا هسته ای 2تا5 قسمتی دارند و در سیتوپلاسم آنان تعداد کمی دانه وجود دارد که رنگ های آزور را به خود گرفته و صورتی رنگ میشوند. این دانه ها که آزوفیل خوانده می شوند،به علت دارا بودن آنزیم های هیدرولیز کننده خاصیت لیزوزومی دارند. بازوفیل ها هسته ی چند قسمتی دارند که چند قسمتی بودن هسته آنان کمتر مشخص است. دانه های آن با جذب رنگ آبی متیلن به رنگ بنفش تیره دیده میشوند. خاصیت باز دوستی (بازوفیلی) به علت وجود هپارین در آنهاست که یک موکو پلی ساکارید سولفاته بشدت آنیونی است. ائوزینوفیل ها دارای هسته ی سه قسمتی ، که دو قسمت بزرگ آن توسط قسمت کوچکتر به وصل شده است. در سیتوپلاسم آنها دانه های بزرگ و زیادی وجود دارد که به خاطر دارا بودن اسید آمینه ای به نام آرژنین(با بار مثبت) رنگ اسیدی ائوزین را به خود گرفته و به رنگ سرخ روشن در می آید. خون علاوه بر سلول های فوق دارای عناصری به نام پلاکت هاست که اغلب پس از رنگ آمیزی به صورت تخم مرغی شکل به اندازه ی 3 تا 4 میکرون به صورت گروه های 2 تا 3 تایی مشاهده میشوند. پلاکت ها بدون هسته اند و نقش اصلی آنها در انعقاد خون است. در رنگ آمیزی سلول های خون به دو روش رنگ آمیزی گیمسا و رایت سلول ها را مشاهده میکنیم. روش تهیه محلول گیمسا موا لازم : پودر گیمسا۸/۰ گرم - متانول ۵۰ میلی لیتر -گلیسرول ۵۰ میلی لیتر طرز تهیه : ابتدا باید مخلوطی از ۵۰میلی لیترمتانول و ۵۰ میلی لیتر گلیسرول تهیه کرد.سپس ۸/۰ گرم از پودر گیمسا را در محلول فوق ریخته و به کمک همزن مغناطیسی با هم مخلوط می کنیم. محلولی که بدین سان بدست میاید محلول ذخیره است که باید در شیشه های تیره رنگ و دور از نور نگهداری شود. و هنگام استفاده باید یا آب مقطر ۱۰ تا ۵۰ بار رقیق شود. میزان دقت رقیق کردن به صورت تجربی بدست میآید. روش تهیه محلول رایت مواد لازم : پودر رایت ۳/۰ گرم -متانول ۱۰۰ میلی لیتر طرز تهیه : محلولی که از مواد فوق بدست میاید محلول ذخیره است که باید یک تا دو روز دز دمای آزمایشگاه بماندو پس از صاف شدن درون شیشه ی تیره رنگ در سمباده ای نگهداری شود . این محلول موقع استفاده رقیق نمی شود و مستقیما روی لام ریخته می شود. روش کار برای مشاهده سلول های خونی ابتدا باید لام گسترده یا اسمیر خون را تهیه کرد. طرز تهیه اسمیر: لام تمیزی برداشته و قطره ای خون (بوسیله لانست نوک انگشت خود را سوراخ کرده قطره ای خون تهیه میکنیم )روی لبه آن میگذاریم.اکنون لام تمیز دیگری برداشته وآن را به صورت مورب با زاویه حدود ۲۰ تا ۳۰ درجه روی لام اول قرار دهید وفرصت دهید تا خون در لبه ی این لام پخش شود.لام دوم را با سرعت و ملایمت روی لام اول بکشید. تا لایه ای نازک و گسترده از خون روی لام اول ایجاد شود. رنگ آمیزی با محلول رنگی رایت 1- سطح لام های گسترده را پس از خشک شدن به مدت 5 دقیقه با مقداری از محلول رنگی رایت بپوشانید.2- به میزان 2 برابر حجم رنگ مورد استفاده، بافر فسفات رقیق (با PH حدود 5/6 ) روی لام بریزید با رنگ موجود روی لام رقیق شود.رنگ رقیق شده را به مدت 10 دقیقه روی لام نگه دارید و سپس درو بریزید.3- لام را با آب شیر بشویید تا رنگ لام صورتی شود.4-پس از خشک شدن لام ها ، سلول های خون را به کمک روغن ایمرسیون و یا روغن سدر زیر میکروسکوپ با بزرگنمایی 100 مشاهده کنید. رنگ آمیزی با محلول رنگی گیمسا 1- لام گسترده خشک شده را 2 تا 5 دقیقه در متانول تثبیت کنید.2- لام را پس از خارج کردن از متانول، در محلول رنگی گیمسای رقیق شده با آب مقطر فرو برید و آنها را به مدت 20 تا 30 دقیقه در این محلول رنگی قرار دهید و سپس با آب جاری از شیر بشویید.3- پس از خشک شدن لام ها ، سلول های خون را به کمک روغن ایمرسیون و یا روغن سدر زیر میکروسکوپ با بزرگنمایی 100 مشاهده کنید. منبع :کتاب آزمایشگاه زیست شناسی سلولی/انتشارات پیام نورنویسنده : فرشته حامدی نیا [Hidden Content]